-------------------------------------------------------------------------------- 一、計(jì)劃任務(wù)及考核目標(biāo) (一)大豆有效成分提取加工技術(shù)研究 篩選出適合提取SOD的大豆(豆類)原料；研究提取大豆SOD的工藝；研 究選擇大豆SOD的檢測方法；研究大豆SOD的應(yīng)用方法。大豆復(fù)合物SOD 的 活性定為30～50um/ｍｌ，或大豆SOD精品為1000～3000um/ｍｇ；大豆SOD 的理化指標(biāo)和衛(wèi)生指標(biāo)符合國家規(guī)定；中試生產(chǎn)大豆SOD復(fù)合物50kg。 (二)吉林酸豆奶研究 選擇適合做酸豆奶的原料品種，確定最佳發(fā)芽時(shí)期，篩選和組合乳酸 菌群，確定發(fā)酵溫度和冷卻辦法。制成無豆腥味、酸甜適中、組織細(xì)膩的 酸豆奶，活菌數(shù)達(dá)到10��6～10��9個(gè)/ｍｌ。 篩選乳酸菌種，確定最佳發(fā)芽期。完成菌種認(rèn)證和酸奶理化、衛(wèi)生指 標(biāo)檢測。組建中試室，達(dá)到每次生產(chǎn)1000瓶規(guī)模。 (三)高效價(jià)蛋白食品技術(shù)研究 選育耐高溫菌種。以大豆或豆渣為原料，通過少胞根霉的轉(zhuǎn)化，研制 高蛋白食品。 選育出耐高溫菌種。研制出高蛋白食品，粗蛋白得率大于55％，消化 吸收率大于67％。 (四)利用微生態(tài)益菌發(fā)酵大豆粉提取SOD研究 研究大豆粉在培養(yǎng)基中的比重對微生態(tài)益菌SOD產(chǎn)量的影響。 研究不 同溫度、pH值、通氧量及金屬離子加入量對益生態(tài)菌SOD產(chǎn)量的影響。 完 成SOD層析純化流程研究，研究不同破碎方法對菌細(xì)胞SOD活性和提取量的 影響及去除雜蛋白的方法研究。研究S OD活性保持技術(shù)，研究層析提取技 術(shù)及半衰期，確定減少影響SOD活性方法。 從微生物資源中篩選出高SOD含量菌株3～4株，每克菌SOD活性指標(biāo)達(dá) 650um(NBT法)。完成SO D中試，生產(chǎn)出 SOD 純酶水劑， 活性為 1000 ～ 3000um/ｍｌ；粉劑1 ｇ，活性為3000～5000um/ｍｌ。 二、計(jì)劃完成情況 (一)大豆有效成份提取加工技術(shù)研究 從140多個(gè)大豆品種中篩選出3個(gè)SOD含量較高、易提取的品種。 采用 中藥制劑的方法提取SOD。提取的大豆SOD，輔以“藥食同源”中藥，制成 保健型大豆SOD口服液，經(jīng)動物試驗(yàn)證明具有抗疲勞、抗衰老， 抗炎和提 高血液中SOD活性等功能。確定“NBT”法為檢測大豆SOD的主要方法。 經(jīng) 解放軍301醫(yī)院檢測，大豆SOD口服液的SOD活性為162.3uｍ/ｍｌ，保存半 年以上的大豆SOD口服液的活性為108.9ｕｍ/ｍｌ；大豆SOD精品SOD 的活 性為190uｍ/ｍｌ。 解決的關(guān)鍵技術(shù) 確定了NBT法(核黃素系統(tǒng))為大豆SOD 的主要測活 方法，對該方法的各個(gè)環(huán)節(jié)都進(jìn)行了仔細(xì)的探索和反復(fù)試驗(yàn)，制定了一套 適合檢測大豆SOD活性的程序和方法，使用該方法檢測大豆SOD的活性結(jié)果 比較穩(wěn)定。研究了一套適宜制備大豆SOD的工藝方法，解決了用動物血SOD 提取方法制備大豆SOD的成本高、得率低的問題，用該工藝提取大豆SOD活 性提高50％以上。用中藥制劑處理大豆SOD復(fù)合液，消除了大豆SOD復(fù)合液 中的絕大部分胰蛋白酶抑制劑。大豆制品中的胰蛋白酶抑制劑降低腸內(nèi)胰 蛋白酶的有效活性，對胰腺分泌水平反饋抑制，對人體產(chǎn)生危害，傳統(tǒng)加 熱消降胰蛋白酶抑制劑的方法，使大豆SOD全部失活。 該研究采用中藥制 劑消除胰蛋白酶抑制劑，同時(shí)保留了大豆SOD活性。大豆SOD與動物血 SOD 一樣，是一種生物活性不穩(wěn)定的酶，在自然條件下存放很容易失活，延長 產(chǎn)品的貨架期是生產(chǎn)SOD制品的關(guān)鍵，我們制成的大豆SOD復(fù)合液，在室溫 和自然光照條件下存放六個(gè)月，SOD活性損失不超過50％。 大豆SOD提取技術(shù)和大豆SOD口服液經(jīng)世界聯(lián)機(jī)檢索和國內(nèi)文獻(xiàn)檢索證 明，屬世界首創(chuàng)，大豆SOD口服液經(jīng)動物試驗(yàn)表明， 具有明顯的抗炎性， 抗疲勞、抗衰老功能，給予12小時(shí)內(nèi)血液中SOD活性增高。 (二)吉林酸豆奶研究 選擇大豆高產(chǎn)品種為原料，最佳發(fā)芽期為芽長1ｃｍ。 選擇保加利亞 桿菌等混合菌群為發(fā)酵劑，該發(fā)酵劑需前期馴化。以發(fā)芽大豆為原料，輔 之以少量奶粉、糖等輔料作發(fā)酵底物，加入發(fā)酵劑后發(fā)酵，經(jīng)過物理、化 學(xué)和生物學(xué)綜合方法處理，消除大豆有害因子和豆腥味。產(chǎn)品組織細(xì)膩， 呈乳白色，凝乳性佳，酸甜適口。含有豐富的氨基酸和礦物質(zhì)。尤其該產(chǎn) 品含有豐富的SOD，能起到消除疲勞、抗衰老、抗炎的保健作用。 其中含 活菌數(shù)達(dá)到10��6/ ｍｌ以上。 完成產(chǎn)品的理化、 衛(wèi)生指標(biāo)檢測， 符合 GB2746-81標(biāo)準(zhǔn)。組建了中試室，其中發(fā)芽室6ｍ��3，發(fā)酵室12ｍ��3。每 次可以生產(chǎn)1000瓶以上。1991年8月向國家專利局申報(bào)了專利，1992年1月 公開。 解決的關(guān)鍵技術(shù) 篩選了適合豆芽酸奶制作的菌種。確定了作原料的 品種和發(fā)芽時(shí)期。確定了最佳底物配方。 (三)高效價(jià)蛋白食品技術(shù)研究 篩選、分離和鑒定了特定菌種RT-3。制成了風(fēng)味較好的丹貝系列食品。 丹貝蛋白含量(干基)為54.1％。丹貝蛋白消化率為94.35％。 原料利用率 為80％，蛋白質(zhì)得率為90％。 解決的關(guān)鍵技術(shù) 選育出耐高溫菌種RT-3，經(jīng)認(rèn)定是少胞根霉，能適 合丹貝發(fā)酵的基質(zhì)高溫條件。研制出新型菌絲型發(fā)酵劑，解決了丹貝規(guī)模 生產(chǎn)時(shí)對發(fā)酵劑的要求。按規(guī)定程序?qū)Φへ愡M(jìn)行了系統(tǒng)的安全研究。并證 明安全無害。首次發(fā)現(xiàn)丹貝異黃酮及其生物活性，并建立丹貝異黃酮的快 速檢測法。采用高溫短時(shí)滅菌工序有效抑制了丹貝后加工過程中的品質(zhì)劣 化問題。研究結(jié)果初步表明，發(fā)酵過程中隨菌絲的生長，分泌超氧化物歧 化酶(SOD)，其效價(jià)達(dá)700um/g樣品，關(guān)于少胞根霉產(chǎn)生超氧化物歧化酶還 是第一次報(bào)告。 (四)利用微生態(tài)益菌發(fā)酵大豆提取SOD研究 已篩選菌株4個(gè)(活性達(dá)650u/ｇ菌)。確定了大豆發(fā)酵底物配方，大豆 粉量為1.5％～3％。完成了提取工藝，得精品5ｇ，活性為3800～4000uｍ /ｍｇ 在櫻桃、草霉、蘋果、桃上進(jìn)行了SOD應(yīng)用試驗(yàn)，可以提高果實(shí)SOD含 量15％～20％。 解決的技術(shù)關(guān)鍵 篩選了理想的菌種。確定了發(fā)酵底物配方。完成了 包括層析法、去雜蛋白法的全部工藝。采用粉狀于瓶中保存。 三、專家驗(yàn)收評價(jià)意見 (一)從140多個(gè)大豆品種中篩選了三個(gè)SOD 含量較高的品種， 確定“ NBT”法為大豆SO D最佳檢測方法，完成了以“二法”處理大豆， 以中等 藥制劑為沉降劑相配套的大豆SOD提取工藝研究，使大豆SOD口服液活性達(dá) 到108ｕｍ/ｍｌ。精品活性為190uｍ/ml。在實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)出大豆SOD復(fù)合物 50ｋｇ。 (二)研究確定了大豆發(fā)芽的最佳發(fā)芽期，篩選馴化了發(fā)酵劑，設(shè)計(jì)了 配方，制得的吉林酸豆奶消除了豆腥味，活菌數(shù)達(dá)到10��6個(gè)/ml以上，并 含有SOD。該技術(shù)通過農(nóng)業(yè)部鑒定。 (三)研究篩選、鑒定了特定菌種RT-3，制成了風(fēng)味較好的丹貝食品， 其消化率為94％，原種利用率為80％。建立了免疫檢測系統(tǒng)，并首次證明 產(chǎn)品中含有異黃酮和SOD。該技術(shù)通過部鑒定。 (四)利用微生態(tài)益菌發(fā)酵大豆粉提取SOD研究篩選了菌株4個(gè)，確定了 配方，提取精品5ｇ，活性達(dá)到3800～4000uｍ/ｍｇ，并在櫻桃等4種果樹 上應(yīng)用，使果實(shí)中SOD含量提高15%～20％。 專題共開發(fā)新產(chǎn)品7項(xiàng)，研究新技術(shù)新工藝10項(xiàng)，申報(bào)專利4項(xiàng)，獲專 利3項(xiàng)，通過鑒定2項(xiàng)，撰寫研究論文40篇。簽訂技術(shù)轉(zhuǎn)讓合同9份， 成交 額74萬元，綜合經(jīng)濟(jì)效益達(dá)600萬元。 專題主持單位：吉林省農(nóng)科院 專題參加單位：南京、北京農(nóng)業(yè)大學(xué)（ 佚名）