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大巖桐傳統(tǒng)繁殖方法為播種法、扦插法、分球法等。大巖桐種子極小,每克種子有2.5萬(wàn)粒至3萬(wàn)粒,壽命較短,僅兩個(gè)月左右。播種繁殖對(duì)土壤條件要求高,操作精細(xì),且易發(fā)生性狀變異、品種退化現(xiàn)象;扦插法雖可保持原品種特性,但繁殖系數(shù)較低,不能適應(yīng)大批量生產(chǎn)的需要;分球法形成的植株又多具有株形不整齊的缺點(diǎn),生產(chǎn)上亦不常用。基于以上原因,我們從1998年開(kāi)始嘗試用組培法繁殖大巖桐,基本上找到了適合大巖桐誘導(dǎo)、分化和生根的培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件。 材料與方法供試材料為候毛大巖桐。剪取成年植株的幼葉,用流水沖洗半小時(shí),在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒處理。首先將經(jīng)過(guò)消毒處理的植株幼葉放入75%酒精中浸泡30秒鐘,之后用0.1%的氯化汞溶液處理5分鐘至8分鐘,最后用無(wú)菌水沖洗4次備用。以MS為基本培養(yǎng)基,附加蔗糖30克/千克、瓊脂6克/千克及不同種類(lèi)和濃度的激素,在PH值為5.8、溫度為18℃至20℃條件下進(jìn)行誘導(dǎo)、分化、生根培養(yǎng)。 誘導(dǎo)和分化將消毒后的幼葉切成0.4平方厘米至0.5平方厘米的方形小塊,接種到附加2毫克/千克的6-BA、0.2毫克/千克的NAA的MS培養(yǎng)基上(芐氨基嘌呤BA為一種利于長(zhǎng)的細(xì)胞分裂素,荼乙酸NAA為一種促進(jìn)生根的生長(zhǎng)素)在25℃愈傷組織,40天后少數(shù)愈傷組織上可分化出幼芽。 繼代培養(yǎng)將愈傷組織塊上分化出的幼芽切下,轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基上,繼代培養(yǎng)基附加1毫克/千克的6-BA、0.1毫克/千克的NAA,培養(yǎng)溫度為25℃,每天在1000LX至2000LX光強(qiáng)下連續(xù)光照12小時(shí)。一周后幼芽發(fā)育,并在基部形成大量芽體,一般一個(gè)月可長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基面,一個(gè)月應(yīng)轉(zhuǎn)移一次。 生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)中苗高達(dá)2厘米,有3片至4片完整葉片的小植株,轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上,生根培養(yǎng)基為1/2MS,附加1毫克/千克的I-BA(IBA為一種生長(zhǎng)素)。培養(yǎng)條件與繼代培養(yǎng)一致,2周后有根長(zhǎng)出,可煉苗移栽。 煉苗與移栽影響大巖桐的移栽成活率的關(guān)鍵是控制好溫度和濕度,大巖桐要求生長(zhǎng)在高溫、潮濕及半陰環(huán)境,通風(fēng)不宜過(guò)分,要保持較高的空氣濕度。移栽前先閉瓶煉苗1周,洗凈根上附著的培養(yǎng)基,栽入裝有蛭石的營(yíng)養(yǎng)缽中,蛭石用0.5%的KMnO4消毒。搭塑料小拱棚保濕,棚上架遮蔭網(wǎng),保持棚內(nèi)溫度20℃至25℃,兩周后逐漸揭開(kāi)塑料薄膜,一個(gè)月后可定植上盆,常規(guī)培養(yǎng)5月至6月即可開(kāi)花。 大巖桐組培快繁技術(shù),比傳統(tǒng)的播種法、扦插法、分球法繁殖系數(shù)高,植株整齊一致,由于是無(wú)性繁殖,其性狀沒(méi)有明顯的分離。能保持原品種特色和降低繁殖成本。但繼代培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),同樣是在1毫克/千克的6-BA條件下,有部分試管苗發(fā)生玻璃化,失去分化能力,而低于1毫克/千克的6-BA,分化數(shù)量明顯減少,6-BA的適宜濃度有待進(jìn)一步探討。( 佚名)
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